Ako uskutočniť konzistentné šľachtenie: 9 krokov

V chémii sa zriedenie nazýva proces, v dôsledku čoho sa koncentrácia látky zníži v roztoku. Sekvenčné riedenie pozostáva z opakovaných riedení, ktoré vám umožní rýchlo znížiť počiatočnú koncentráciu. Táto metóda sa používa v experimentoch, v ktorých sú potrebné vysoko zriedené roztoky s presnou koncentráciou, často určenou logaritmickou stupnicou, alebo keď je potrebné nájsť hustotu baktérií. Sekvenčné chovy je široko používané v experimentálnych vedy, ako je biochémia, mikrobiológia, farmakológia, fyzika.

Kroky

Metóda 1 z 2:

Sekvenčné riedenie

jeden. Vyberte vhodné rozpúšťadlo. Pri chovom je veľmi dôležité zvoliť správne rozpúšťadlo alebo pufor. Mnohé riešenia môžu byť oddelené destilovanou vodou, ale nie je to vždy. Ak sa zriedite baktérie alebo iné bunky, budete potrebovať príslušné kultúrne prostredie. Zvolený pufor by sa mal používať so všetkými postupnými riedeniami.

Ak si nie ste istí, že je lepšie použiť ako vyrovnávaciu pamäť, požiadajte učiteľa alebo hľadať potrebné informácie na internete: možno niekto už pripravil takéto riešenie.

Obrázok s názvom Do Sériové riedenia Krok 2

2. Pripravte si niekoľko trubíc s 9 mililitrov Buffer. Tieto skúmavky budú hrať úlohu plemenných prázdnych miest. Zriedený vzor v prvej skúmavke umiestnite a potom postupne prenesie roztok do nasledujúcich skúmaviek.

Pred začatím práce je užitočné označiť všetky použité skúmavky, aby sa zamiešali riešenia v procese chovu.

Každá ďalšia testovacia trubica bude obsahovať 10-krát menej koncentrovaného roztoku ako predchádzajúca. V prvej skúmavke bude koncentrácia roztoku 1:10, v druhej - 1: 100, v treťom - 1: 1000, a tak ďalej. Určite vopred Koľko riedení potrebujete a pripravte príslušný počet rúrok.

Obrázok s názvom Do Sériové riedenia Krok 3

3. Pripravte testovaciu trubicu s najmenej 2 mililitrami neriedených roztokov. Pre konzistentné riedenie táto metóda vyžaduje aspoň 1 mililita neriedeného roztoku. Ak existuje len 1 mililiter, nebudete mať nerozdelené riešenie. Napíšte na túto testovaciu trubicu Nr (nerozvinutý roztok).

Pred každým chovom dôkladne premiešajte roztok.

Obrázok s názvom Do Sériové riedenia Krok 4

4. Stráviť prvý chov. Typ 1 mililitr neriedenej s testovacími trubicami v pipete Nr a rozbiť ho do skúmavky s ochrannou známkou 1:10, ktorý obsahuje 9 mililitrov pufra, po ktorom dôkladne premiešte. Výsledkom je, že dostanete riešenie, zriedené 9 mililitrov pufra. Koncentrácia roztoku sa teda zníži o 10 krát.

Obrázok s názvom Do Sériové riedenia Krok 5

päť. Pripravte nasledujúce riešenie. Pre druhý konzistentný chov užívajte 1 mililiter roztoku z testovacej trubice 1:10 a pridajte do 9 mililitračných pufrov v skúmavke 1: 100. Predtým zmiešajte roztok v skúmavke 1:10. Po pridaní roztoku do skúmavky 1: 100, Dôkladne premiešajte jej obsah. V dôsledku toho budete chovať riešenie z testovacej trubice 1:10, A budete mať nové riešenie s koncentráciou 1: 100.

Obrázok s názvom Do Sériové riedenia Krok 6

6. V prípade potreby pokračujte v chovnom riešení. Tento proces sa môže opakovať, pretože nedosiahnete požadovanú koncentráciu. Ak by experiment mal určiť závislosť od koncentrácie, je možné postupne pripraviť roztoky 1, 1:10, 1: 100, 1: 1000.

Metóda 2 z 2:

Výpočet koeficientu chovu a konečného koncentrácie

jeden. Určiť koeficient Zriedenie konečného roztoku. Na to, vynásobte všetky postupné chovné koeficienty. Zodpovedajúci vzorec má nasledujúci formulár: D_T = D_jeden X D₂ X D₃ X ... X D_N, kde D_T - Spoločný chov koeficient, D_N - N-th riediaci koeficient.

Predpokladajme, že 4 krát vykonané chovu s pomerom 1:10. Nahraďte tento koeficient vo vzorci a získajte D_T = 10 x 10 x 10 x 10 = 10.Tisíc.
Po poslednom chovu v štvrtej skúmavke je riešenie 1:10.000, to znamená, že konečné riešenie bude v 10.000 menej koncentrované ako originál (nerozvinutý).

Obrázok s názvom Do Sériové riedenia Krok 8

2. Určite koncentráciu riešenia po chovu. Na stanovenie koncentrácie riešenia po konzistentnom chovu je potrebné poznať počiatočnú koncentráciu. Použite vzorca C_Konečný = C_Zdroj/ D, kde C_Konečný - Koncentrácia rozvedeného riešenia, C_Zdroj - pôvodná koncentrácia, D - určené vyššie koeficient chovu.

Príklad: Ak bola koncentrácia počiatočného roztoku 1.Tisíc.000 buniek na mililiter a chovový koeficient je 1.00, čo sa rovná koncentrácii konečného roztoku?

Používame vzorec:

C_Konečný = C_Zdroj/ D

C_Konečný = 1.Tisíc.000/1.Tisíc

C_Konečný = 1.000 buniek na mililiter.

Obrázok s názvom Do Sériové riedenia Krok 9

3. Skontrolujte rozmer. Pri vykonávaní akýchkoľvek výpočtov by ste sa mali uistiť, že ste dostali správne jednotky merania. Ak ste začali z počtu buniek na mililiter, uistite sa, že výsledok sa získa aj v týchto jednotkách. Ak sa počíta v ppm (ppm), výsledná koncentrácia musí byť tiež vyjadrená v promení.